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IVT circRNA

環状RNA(circRNA)は共有結合で閉じた一本鎖RNAで、キャッピングやpolyAテールを必要とせず、分解動態が変化するため、直鎖状mRNAと比較して導入遺伝子の発現期間を延長できます。IVT circRNAは、このような利点を活かして、ワクチン、遺伝性疾患の治療、免疫系の調節などの治療用途に急速に開発が進んでいます。VectorBuilderは、様々なスケールでのcircRNAのカスタム生産をご提供しています。

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特長

sequence optimization

コーディング領域とIRESに対する独自の配列最適化

circle RNA

専門チームにより高い収量、純度、そして発現量のcircRNAをお届けします

Highest-quality-and-consistency

包括的なQCをご提供

サービスの詳細

技術情報

circRNAの環状化と翻訳

VectorBuilderは、グループIパーミュートイントロン-エクソン(PIE)自己スプライシング技術に基づき、高収率かつ高純度のcircRNAを生成するための最適化された製造プラットフォームを開発しました ( 図1 )。このメカニズムによるcircRNAの生成は、不純物を最小限に抑え、損傷しにくい配列を実現します。circRNAの翻訳はIRESに依存しています。IRESは、転写物の 5' 末端とは無関係に、内部で翻訳を開始するようにリボソームをリクルートします。

Mechanism_of_circRNA_self-splicing_and_generation_in_vitro

図1. circRNAの自己スプライシングとin vitro生成メカニズム。circRNAの翻訳はIRESに依存する。

実験結果例

図2.  EGFPをコードするcircRNAまたは従来のmRNAをHEK293T細胞に導入した際の発現期間の比較  

IVT RNAのタイプ別比較
mRNA circRNA saRNA
構造 直鎖状; 通常は 5’ cap, 5’ UTR, ORF for GOI, 3’ UTR,とpolyAテールを含む 環状; 通常はIRESとGOIのORFを含む 直鎖状; 通常は 5’ UTR, レプリカ―ぜとGOIのORF,3’ UTR,とpolyAテールを含む
Cap 安定性とリボソームのリクルートには 5’ Capが必要 Capなし; リボソームの誘導はIRESに依存 安定性とリボソームのリクルートには 5’ Capが必要
RNAの長さ (nt) 100 ~ 10,000 1000 ~ 5000 7000 ~ 10,000
安定性 低い 高い 低い
修飾ヌクレオチドを取り込ませることが可能か? Yes No Yes
発現量Expression level 低い 中程度 高い
発現期間Expression duration 短い 中程度 長い
免疫原性 低い 中程度 高い